国立美国历史博物馆第二层以人文文化为主，设第一夫人服饰、美国社区演变、星条旗帜、从客厅到政治等专题展厅，以复原陈列方式展出欧洲移民的住房模型，生活陈设品，日程生活用具，民俗资料等
馆内不乏具有珍贵历史价值的实物，例如美国第一任总统华盛顿戴过的假发和使用过的佩剑，杰斐逊起草《独立宣言》时用过的办公桌以及1812年第二次对英战争中飘扬在麦克亨利堡上空的长14米，宽10米的大星条旗
在第二层的展厅，新近开放了为911专辟的展区：911-历史的见证
在那里，人们可以看到前纽约市长朱利安尼在纪念活动中带过的帽子、来自各地的义务工作者在救援活动中使用过的工具、纽约警车残骸以及无数的图片与故事等，这些物品，忠实记录着那一震惊世界的事件，更提醒人们对生命的尊重与生存的意义
此展览近期正在全国巡回，引起强烈反响
对女性最具吸引力的应当是第一夫人馆，其中分3部分，分别说明总统夫人的政治角色，公众形象和展示从桃丽·麦迪逊到南西·雷根共十六位总统夫人的服饰以及真人大小的穿着礼服的历届美国第一夫人蜡像，形态逼真，从独特角度演示着200多年间服饰的演变
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