毒芹碱生物碱

毒芹碱生物碱是一类含氮的天然有机化合物(不包括蛋白质、肽类、氨基酸和维生素等生物体必需的含氮化合物)

多具有复杂的氮杂环状结构,具有碱的性质,能与酸成盐,具有较强的生物活性

生物碱的分类方法主要有三种:按来源分类,如长春花生物碱类、麦角生物碱类等;按化学结构分类,如异喹啉类生物碱、吡咯烷类生物碱等;按生源结合化学分类,如来源于鸟氨酸的吡啶生物碱等

生物碱最常用的检识方法是沉淀反应

沉淀反应是利用大多数生物碱(有机胺类除外)在酸性条件下能和某些酸类、重金属盐类以及一些较大分子量的复盐发生反应,生成不溶于水的盐、复盐

这些能与生物碱产生沉淀的试剂称为生物碱沉淀试剂,生物碱的沉淀试剂种类很多,最常用的有碘化铋钾试液,碘化钾碘试液、碘化汞钾试液和硅钨酸试液

生物碱沉淀反应可用于预试药材中是否含有生物碱,在分离提取过程中可作为追踪生物碱的指标;也可用于分离纯化生物碱;还可用于生物碱的鉴定和含量测定

生物碱的薄层色谱常用氧化铝和硅胶作为吸附剂

展开剂以苯或氯仿为主组成,根据生物碱的极性强弱适当加入其它溶剂加以调整,使展开剂的极性与生物碱的极性相适应

但因硅胶本身呈弱酸性,生物碱在硅胶板上分离结果不理想

因此需要在碱性条件下才能得到满意的结果

一般加碱的方法有三种:①在湿法铺板时加一定量的氢氧化钠水溶液,使硅胶板呈碱性;②在中性展开剂中加入一定量的二乙胺或氨水,如氯仿-二乙胺(9 :5或9 :1);③在层析槽中放一盛有氨水的小杯

生物碱的纸色谱主要指以水为固定相的分配色谱

由于生物碱在不同的pH值条件下可以盐或游离碱的形式存在,因此,在展开过程中,必须使样品全部离子化或全部以分子的形式存在

生物碱纸色谱常以两种形式进行

其一是在酸性条件下以盐的形式进行展开,生物碱盐的亲水性较强,极性比游离生物碱大,故用极性大的溶剂系统

最常用的溶剂系统为正丁醇-醋酸-水(4 :1 :5上层)

为了保证生物碱全部离子化,也可将色谱滤纸预先用一定pH值的缓冲溶液处理,然后再用丁醇-水作为溶剂展开

另一种方法是生物碱以分子形式进行展开

由于分子状态的生物碱亲脂性较强,故溶剂系统的极性也应减小

在实际工作中,多以非水的亲水性溶剂甲酰胺代替水作为固定相,以亲脂性溶剂如苯、氯仿或醋酸乙酯等为移动相进行展开

这种方法不但能获得较满意的结果,而且能大大地缩短操作的时间(一般1~3小时就能完成),比用水为固定相的纸色谱法要优越

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